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可見分光光度計的工作原理是什么?
點擊次數(shù):7284 更新時間:2020-09-30
利用可見光等測定物質(zhì)的吸收光譜,利用此光譜對物質(zhì)進行定性定量分析和
物質(zhì)結(jié)構(gòu)分析的方法,稱為分光光度法,使用的儀器是分光光度計??梢姺止夤舛扔嬍且环N結(jié)構(gòu)簡潔、使用方便的單光束
分光光度計
,是生物化學研究中*的基本手段之一??梢姺止夤舛扔嫷墓ぷ髟硎牵?/span>
當一束
單色光
照射待測物質(zhì)的溶液時,當某一定頻率(或波長)的可見光所具有的能量(
hf
)恰好與待測物質(zhì)分子中的
價電子
的能級差相適應(即Δ
E=E2-E1=hf
)時,待測物將對該頻率(波長)的可見光產(chǎn)生選擇性的吸收。用可見分光光度計可以測量和記錄其吸收程度(
吸光度
)。由于在一定條件下,吸光度
A
與待測物質(zhì)的濃度
C
及吸收地長度
l
的乘積成正比,即
A
=
KCL
,所以,在測得吸光度
A
后,可采用
標準曲線法
、
比較法
以及標準加入法等方法進行定量分析。
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